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內容簡介: |
本书内容包括临床分子生物学检验实验室规则及常用仪器、临床分子生物学检验基本技术和临床分子生物学检验技术综合实验内容,并将常用试剂和缓冲液的配置作为附录。在保留上一版特色的基础上,秉持继承、发扬、创新的精神,坚持实验内容和专业知识的挂钩,做到理论联系实际,注重基础和临床的结合,既突出实用性和可操作性,又兼顾拓展性和创新性。文末附录常用试剂和缓冲液配置,方便教学使用。内容包括各章学习目标、重点和难点内容,满足学生复习、理解并扎实掌握所学知识。
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目錄:
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第一章 临床分子生物学检验实验室规则及常用仪器/1
第一节 临床分子生物学检验实验守则 / 1
第二节 临床分子生物学检验实验室安全管理制度 / 3
第三节 临床分子生物学检验实验室安全应急预案 / 4
第四节 临床分子生物学检验实验室常用仪器介绍 / 5
第二章 临床分子生物学检验基本技术/9
第一节 核酸的分离、纯化与鉴定技术 / 9
实验一 基因组DNA 的分离与纯化/ 9
实验二 RNA 的分离与纯化/ 13
实验三 质粒DNA 的提取与纯化/ 17
实验四 核酸的鉴定与分析 / 19
第二节 核酸扩增技术 / 29
实验五 PCR 技术 / 29
实验六 RT-PCR 技术 / 33
实验七 荧光定量PCR 技术 / 37
第三节 核酸分子杂交及芯片技术 / 41
实验八 DNA 分子杂交 / 42
实验九 RNA 分子杂交/ 45
实验十 荧光原位杂交 / 48
实验十一 DNA 芯片技术 / 51
第四节 核酸测序及生物信息学分析技术 / 54
实验十二 双脱氧链终止测序法 / 54
实验十三 高通量测序法 / 58
实验十四 测序数据的比对分析 / 61
实验十五 基因功能与通路分析 / 64
第五节 重组DNA 技术 / 66
实验十六 DNA 的限制性核酸内切酶酶切反应 / 67
实验十七 DNA 片段的回收 / 69
实验十八 DNA 的重组连接 / 70
实验十九 感受态细胞的制备及重组子转化 / 72
实验二十 重组子的筛选与鉴定 / 75
第六节 蛋白质组学研究技术 / 81
实验二十一 双向凝胶电泳技术 / 81
实验二十二 蛋白质印迹技术 / 86
第三章 临床分子生物学检验综合性实验/92
第一节 感染性疾病的分子生物学检验 / 92
实验二十三 甲、乙型流感病毒核酸检测 / 92
实验二十四 结核分枝杆菌核酸检测 / 95
实验二十五 人乳头瘤病毒基因分型检测 / 97
实验二十六 丙型肝炎病毒基因分型检测 / 101
第二节 遗传性疾病的分子生物学检验 / 104
实验二十七 地中海贫血致病基因检测 / 104
实验二十八 进行性假肥大性肌营养不良相关基因检测 / 110
实验二十九 遗传性耳聋相关基因检测 / 113
第三节 肿瘤的分子生物学检验 / 116
实验三十 白血病融合基因BCR-ABL 检测 / 116
实验三十一 人表皮生长因子受体-2 基因检测 / 119
实验三十二 表皮生长因子受体基因(EGFR)突变检测 / 122
第四节 药物代谢及个体识别的分子生物学检验 / 126
实验三十三 华法林代谢酶基因检测 / 126
实验三十四 叶酸代谢酶基因检测 / 129
实验三十五 HLA 基因分型检测 / 132
第四章 临床分子生物学检验创新设计性实验/ 136
实验三十六 乙型肝炎病毒DNA 检测标准品的制备/ 136
实验三十七 荧光定量PCR 高分辨率熔解曲线分析检测基因点突变 / 138
实验三十八 线粒体DNA 的异质性突变检测/ 139
实验三十九 肺癌液体活检 / 140
实验四十 宏基因组测序用于难治性感染的检测 / 142
附录 临床分子生物学检验技术实验常用缓冲液与试剂的配制/ 144
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